⑴、建立小型家庭组织培养室,自制设备。众所周知该项工作要在无菌条件下进行。为此,必须研制密封良好的玻璃接种箱、净化空气装置,采取种种技术措施,以降低转瓶污染率。用酒精喷雾降尘,成功率上升为92%,这就给筛选佳培养基配方赢得了时间,奠定了良好的基础。
⑵、无菌操作。所有接触培养基、能耐高温的器 用干热法(140~150OC)处理,对不耐高温的器具采用化学方法灭菌消毒。为解决接种时需要在火焰上进行的问题(因箱内几乎无空气),增添了一只300瓦的电炉,但因温度高易灼坏外植体,故又加设了通风降温的设施。为了减少刀具二次在环境中污染,高温消毒后安放在一端封闭的筒内,同时不断鼓入净化的空气加以冷却,确保外植体安然无恙地进入营养基瓶中。所有进入箱内的物品均需酒精消毒后才放进,凡是带菌者不许入箱。箱体消毒程序是酒精喷雾后紫外线消毒,并定期用甲醛加高锰酸钾进行熏蒸.。
⑶、选用适宜的培养基配方。诱导一分化一生根均采用MS基加萘乙酸、细胞分裂素。但不同的生长阶段还需做成分上的调整,特别是生根时,由于兰花生根较其他品种花卉难些,故采用高浓度的NAA浸泡数秒的做法,效果良好。
⑷、外植体的采取、消毒。外植体以长根的幼苗(未展开叶),随采随接种,成活率较高(接种时节以10月至次年2月好)。外植体消毒,笔者采取0.1升汞加0.1%浓盐酸多次消毒的办法,效果更佳。
⑸、培养环境。光照1000~2000勒,10~16小时,培养温度26OC±2 OC,空气温度应控制在较低的水平(70%~80%),否则可能再一次污染。
①、在家庭中建立小型组培室是可行的,它的投资少(可充分利用家中的条件)。从筹备到进行实验只花去数百元,该实验设备也可用于开展其他品种(如木本、药用植物等)的研究工作。
②、无菌操作必须从思想上重视,操作上谨慎才是,否则损兵折将,后果不堪设想。
③、若无实体显微镜,只能做以芽生芽的实验。采取一些措施如分期切制切样品、液体加旋转床的方案,是取得大批量类原球茎的一种途径,其繁殖速度也会有所突破。